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根据给定GeneID或DNA序列，需要插入的DNA序列，以及插入位置。在插入位置位置附近设计3个sgRNA以及donor并构建载体、转染细胞、单克隆的分选。最终通过测序验证是否得到插入的细胞系。

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病毒性发热是病毒感染后的一个主要症状。它是以病毒作为发热激活物作用于机体产内生致热原细胞，合成和分泌内生致热原，内生致热原再直接或间接作用于体温调节中枢，引起体温调节中枢调定点上移而导致。目前的发热模型中，主要为酵母、内毒素作用于家兔、大鼠等引起，这

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ELISPOT技术的独特优点已经让它在抗原特异性T细胞免疫学研究上独占鳌头。它是当今唯一能够检测到到百万分之一阳性细胞率的检测技术。如此高的灵敏度就连流式细胞技术（细胞内细胞因子染色）和tetrame

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